Clevecord

AVERTISSEMENT

Réactions de perfusion mortelle Greffe par rapport au syndrome de la greffe de la maladie de l'hôte et à la défaillance de la greffe

Réactions de perfusion fatal

L'administration de Clevecord peut entraîner de graves réactions mortelles de perfusion. Surveiller les patients et interrompre la perfusion de Clevecord pour des réactions graves. [Voir avertissements et PRÉCAUTIONS ]

Greffe contre la maladie de l'hôte (GVHD)

La GVHD est attendue après l'administration de Clevecord et peut être mortelle. L'administration de thérapie immunosuppressive peut diminuer le risque de GVHD. [Voir avertissements et PRÉCAUTIONS ]

Syndrome de greffe

Le syndrome de la greffe peut progresser vers l'échec et la mort multi-organismes. Traitez rapidement le syndrome de la greffe avec les corticostéroïdes. [Voir avertissements et PRÉCAUTIONS ]

Panne de greffe

La défaillance du greffon peut être mortelle. Surveiller les patients pour des preuves de laboratoire de récupération hématopoïétique. Avant de choisir une unité spécifique de Clevecord, envisagez de tester les anticorps HLA pour identifier les patients qui sont allo-immunisés. [Voir avertissements et PRÉCAUTIONS ]

Description de Clevecord

Clevecord se compose de cellules progénitrices hématopoïétiques monocytes lymphocytes et granulocytes du sang du cordon humain pour une perfusion intraveineuse. Le sang récupéré du cordon ombilical et du placenta est réduit et partiellement épuisé des globules rouges et du plasma.

L'ingrédient actif est les cellules progénitrices hématopoïétiques qui expriment le marqueur de surface cellulaire CD34. La puissance du sang du cordon est déterminée en mesurant le nombre de cellules nucléées totales (TNC) et des cellules CD34 et la viabilité cellulaire. Chaque unité de Clevecord contient un minimum de 5 x 10 ⁸ cellules nucléées totales avec au moins 1,25 x 10 ⁶ cellules CD34 viables au moment de la cryoconservation. La composition cellulaire de Clevecord dépend de la composition des cellules dans le sang récupéré du cordon ombilical et du placenta du donneur. Les cellules nucléées réelles comptent les cellules CD34 comptent le groupe ABO et le typage HLA sont répertoriées dans les enregistrements qui l'accompagnent envoyés avec chaque unité individuelle.

À quelle fréquence prenez-vous l'imodium

Clevecord possède les ingrédients inactifs suivants: diméthyl sulfoxyde (DMSO) Citrate phosphate dextrose (CPD) Hydroxyethyl Starch et dextran 40. Lorsqu'il est préparé à la perfusion selon les instructions, l'infusate contient les ingrédients inactifs suivants: Dextran 40 Sérum albumine DMSO résiduelle hydroxyéthyl-étoile et CPD.

Utilisations pour Clevecord

Clevecord HPC (cellules progénitrices hématopoïétiques) Le sang du cordon allogénique de la thérapie des cellules progénitrices hématopoïétiques indiquées pour une utilisation dans un régime préparatif hématopoïétique des donneurs non apparenté procédures de transplantation de cellules acquis ou résulte d'un traitement myéloablatif.

L'évaluation des avantages du risque pour un patient individuel dépend des caractéristiques du patient, notamment des facteurs de risque de stade de la maladie et des manifestations spécifiques de la maladie sur les caractéristiques du greffon et sur d'autres traitements ou types de cellules progénitrices hématopoïétiques.

Dosage pour Clevecord

• Pour une utilisation intraveineuse uniquement.
• N'irradez pas.

La sélection et l'administration de l'unité de Clevecord doivent être effectuées sous la direction d'un médecin subi dans la transplantation de cellules progénitrices hématopoïétiques.

Dosage

La dose minimale recommandée est de 2,5 x 10 ⁷ cellules nucléées / kg à la cryoconservation. Plusieurs unités peuvent être nécessaires pour atteindre la dose appropriée.

L'appariement pour au moins 4 des 6 antigènes HLA-A antigènes HLA-B et les allèles HLA-DRB1 est recommandé. Le typage HLA et la teneur en cellules nucléés pour chaque unité individuelle de Clevecord sont documentés dans les enregistrements qui l'accompagnent.

Préparation de la perfusion

Clevecord doit être préparé par un professionnel de la santé formé.

• N'irradez pas Clevecord.
• Voir les instructions détaillées annexées pour la préparation de Clevecord pour la perfusion.
• Clevecord peut être stocké à 15-25 ° C jusqu'à 4 heures depuis le dégel. [Voir Instructions pour la préparation de la perfusion ]
• La limite recommandée sur l'administration du DMSO est de 1 gramme par kg de poids corporel par jour. [Voir AVERTISSEMENTS AND PRÉCAUTIONS et Sur-ladosage ]

Administration

Clevecord devrait être administré sous la supervision d'un professionnel de la santé qualifié expérimenté dans la transplantation de cellules progénitrices hématopoïétiques.

1. Confirmez l'identité du patient pour l'unité spécifiée de Clevecord avant l'administration.
2. Confirmez que des médicaments d'urgence sont disponibles pour une utilisation dans la zone immédiate.
3. Assurez-vous que le patient est hydraté adéquatement.
4. Pré-média le patient 30 à 60 minutes avant l'administration de Clevecord. La prémédication doit inclure tout ou partie des éléments suivants: antagonistes et corticostéroïdes antipyrétiques.
5. Inspectez le produit pour toute anomalie telle que les particules inhabituelles et pour les violations de l'intégrité des conteneurs avant l'administration. Avant la perfusion, discutez de toutes ces irrégularités du produit avec le laboratoire émettant le produit de perfusion.
6. Administrer Clevecord par perfusion intraveineuse. N'administrez pas dans les mêmes tubes en même temps que des produits autres que l'injection de chlorure de sodium (USP) autres que 0,9% de chlorure de sodium. Clevecord peut être infusé par un filtre de 170 à 260 micron conçu pour éliminer les caillots. N'utilisez pas de filtre conçu pour éliminer les leucocytes.
7. Infuser Clevecord sur 15 à 60 minutes selon le volume du produit et le poids du patient. Le taux de perfusion ne doit pas dépasser un maximum de 5 millilitres par kilogramme par heure. Réduisez le taux de perfusion si le patient ne peut pas tolérer la charge fluide. Arrêtez la perfusion en cas de réaction allergique ou si le patient développe une réaction de perfusion modérée à sévère. [Voir AVERTISSEMENTS AND PRÉCAUTIONS et Effets indésirables ]
8. Surveillez le patient pour les effets indésirables pendant et pendant au moins six heures après l'administration. Parce que Clevecord contient des globules rouges lysés qui peuvent provoquer une insuffisance rénale, une surveillance minutieuse de la sortie d'urine est également recommandée.

NOTE: Si le produit est en cours de préparation pour une perfusion multi-unités, préparez et infusez chaque unité indépendamment. Si une réaction se produit de manière appropriée la réaction avant qu'une autre unité ne soit décongelée pour la perfusion

Comment fourni

Formes et forces posologiques

Chaque unité Clevecord contient un minimum de 5 x 10 ⁸ cellules nucléées totales avec un minimum de 1,25 x 10 ⁶ Des cellules CD34 viables en suspension dans 10% de diméthyl sulfoxyde (DMSO) et 1% de dextrane 40 au moment de la cryoconservation.

La teneur en cellule nucléée précryopréservation exacte est fournie dans les enregistrements qui l'accompagnent.

Stockage et manipulation

Clevecord est fourni comme une suspension cellulaire cryoconservée dans un sac scellé contenant un minimum de 5 x 10 ⁸ cellules nucléées totales avec un minimum de 1,25 x 10 ⁶ cellules CD34 viables dans un volume de 25 millilitres (ISBT 128 Code produit S1393 Numéro d'identifiant de l'installation ISBT 128 W4215). La teneur en cellule nucléée précryopréservation exacte est fournie dans les enregistrements qui l'accompagnent.

Stockez Clevecord à ou en dessous de -150 ° C jusqu'à ce qu'il soit prêt pour la décongélation et la préparation.

Distribué par: Cleveland Cord Blood Center 25001 Emery Road Suite 150 Cleveland OH 44128. Révisé: avril 2017

Effets secondaires pour Clevecord

Le jour 100, la mortalité de toutes les causes était de 25%.

Les effets indésirables liés à la perfusion les plus courants (≥ 5%) sont l'hypertension des vomissements nausées bradycardie et fièvre.

Expérience des essais cliniques

Étant donné que les essais cliniques sont menés dans des conditions de réaction indésirables très variables observées dans les essais cliniques d'un médicament ne peuvent pas être directement comparées aux taux dans les essais cliniques d'un autre médicament et ne peuvent pas refléter les taux observés dans la pratique.

L'évaluation de la sécurité de Clevecord est basée principalement sur l'examen des données soumises aux dockés de la FDA à partir de diverses sources l'ensemble de données de l'étude COBLT et de la littérature publiée.

Réactions de perfusion

Les données décrites dans le tableau 1 reflètent l'exposition à 442 perfusions de sang de cordon HPC (à partir de plusieurs banques de sang de cordon) chez les patients traités en utilisant une dose cellulaire nucléée totale ≥2,5 x 10 ⁷ / kg sur un essai à bras unique ou une utilisation accrue d'accès (l'étude COBLT). La population était de 60% de sexe masculin et l'âge médian était de 5 ans (intervalle de 0,05 à 68 ans) et comprenait des patients traités pour les tumeurs malignes héréditaires des troubles métaboliques hérités des immunodéficiences primaires et une défaillance de la moelle osseuse. Les régimes préparatifs et la prophylaxie de la maladie de la greffe contre l'hôte n'ont pas été standardisés. Les réactions de perfusion les plus courantes étaient l'hypertension des vomissements nausées et bradycardie du sinus. L'hypertension et toutes les réactions liées à la perfusion de grade 3 à 4 se sont produites plus fréquemment chez les patients recevant du sang de cordon HPC dans des volumes supérieurs à 150 millilitres et chez les patients pédiatriques. Le taux de réactions cardiopulmonaires défavorables graves était de 0,8%.

Tableau 1: Incidence des effets indésirables liés à la perfusion survenant dans ≥ 1% des perfusions (l'étude COBLT)

Des informations sur les réactions de perfusion étaient disponibles à partir de rapports volontaires pour 91 patients qui ont reçu une dose cellulaire nucléée totale ≥ 2,5 x 10 ⁷ / kg d'au moins une seule unité de Clevecord seul ou en combinaison avec une autre unité de sang de cordon HPC et qui avait un match HLA> 3/6. La population comprenait 55% d'hommes et 45% de femmes avec un âge médian de 38 ans (intervalle <1-68 years). Preparative regimens et graft-versus-host disease prophylaxis were not stetardized. The reactions were not graded. An infusion reaction occurred in 20% of patients. The most common infusion reactions occurring in ≥ 1% of infusions were hypertension (17%) nausée or vomissement (3%) et hypoxia (3%).

Autres réactions indésirables

Pour d'autres effets indésirables, les données cliniques brutes du dossier ont été regroupées pour 1299 patients (120 adultes et 1179 pédiatriques) transplantés avec du sang de cordon HPC (à partir de plusieurs banques de sang de cordon) avec une dose cellulaire nucléée totale ≥ 2,5 x 10 ⁷ / kg. Parmi ces 66% (n = 862) ont subi une transplantation comme traitement de la malignité hématologique. Les régimes préparatifs et la prophylaxie de la maladie de la greffe contre l'hôte variaient. La dose de cellule nucléée totale médiane était de 6,4 x 10 / kg (plage 2,5-73,8 x 10 / kg). Pour ces patients, la mortalité du jour 100e de toutes les causes était de 25%. Une défaillance du greffon primaire s'est produite à 16%; 42% ont développé des classes 2 à 4 maladies aiguës du greffon contre l'hôte; et 19% ont développé des classes 3 à 4 maladies aiguës du greffon vers l'hôte.

Les données de la littérature publiée et des registres d'observation des bases de données institutionnelles et des revues de banque de sang de cordon ont été signalées au dossier du sang de cordon HPC (provenant de plusieurs banques de sang de cordon) ont révélé neuf cas de leucémie à cellules donneuses Un cas de transmission de l'infection et un rapport de transplantation d'un donneur ayant un trouble génétique héréditaire. Les données sont insuffisantes pour soutenir des estimations fiables des incidences de ces événements.

Dans l'étude COBLT, 15% des patients ont développé un syndrome de greffe.

Interactions médicamenteuses pour Clevecord

Aucune information fournie

Effets secondaires du stylo à insuline de Lantus

Avertissements pour Clevecord

Inclus dans le cadre du PRÉCAUTIONS section.

Précautions pour Clevecord

Réactions d'hypersensibilité

Des réactions allergiques peuvent survenir avec la perfusion de sang de cordon HPC, y compris Clevecord. Les réactions incluent le bronchospasme sifflant le prurit d'œdème angio-œdème et les ruches [voir Effets indésirables ]. Des réactions d'hypersensibilité graves, y compris l'anaphylaxie, ont également été rapportées. Ces réactions peuvent être dues à l'amidon d'hydroxyéthyle de diméthyl sulfoxyde (DMSO) ou à un composant plasmatique de Clevecord.

Clevecord may contain residual antibiotics if the cord blood donor was exposed to antibiotics in utero. Patients with a history of allergic reactions to antibiotics should be monitored for allergic reactions following Clevecord administration.

Réactions de perfusion

Les réactions de perfusion devraient se produire et peuvent inclure des nausées vomissements de vomissements de fièvre ou des refroidissements rinçage de la dyspnée de la dyspnée de la dyspnée de la poitrine Hypertension Tachycardie Bradycardie dysgeusia hématurie et maux de tête légers. La prémédication avec les antagonistes et les corticostéroïdes de l'antipyrétique et les corticostéroïdes peut réduire l'incidence et l'intensité des réactions de perfusion.

Des réactions sévères, notamment une détresse respiratoire, une bradycardie sévère grave avec un bloc cardiaque ou d'autres arythmies d'arrêt cardiaque Hypotension Hémolyse des enzymes hépatiques élevées compromis rénale Encéphalopathie La perte de conscience et de la crise peut également se produire. Beaucoup de ces réactions sont liées à la quantité de DMSO administrée. La minimisation de la quantité de DMSO administrée peut réduire le risque de telles réactions bien que des réponses idiosyncratiques puissent se produire même à des doses de DMSO considérées comme tolérées. La quantité réelle de DMSO dépend de la méthode de préparation du produit pour la perfusion. Il est recommandé de limiter la quantité de DMSO à pas plus de 1 gramme par kilogramme par jour. [Voir Sur-ladosage ]

Les réactions de perfusion peuvent commencer quelques minutes suivant le début de la perfusion de Clevecord, bien que les symptômes puissent continuer à s'intensifier et à ne pas culminer pendant plusieurs heures après la fin de la perfusion. Surveillez attentivement le patient pendant cette période. Lorsqu'une réaction se produit, arrêtez la perfusion et instituant les soins de soutien au besoin. Si vous infusez plus d'une unité de sang de cordon HPC le même jour, n'administrez pas les unités suivantes tant que tous les signes et symptômes de réactions de perfusion de l'unité précédente n'ont résolu.

Maladie de greffe contre-hôte

Une maladie aiguë et chronique de la greffe contre l'hôte (GVHD) peut survenir chez des patients qui ont reçu Clevecord. La GVHD aiguë classique se manifeste comme une bilirubine et des enzymes hépatiques élevées et diarrhée. Les patients transplantés avec Clevecord devraient recevoir des médicaments immunosuppresseurs pour diminuer le risque de GVHD. [Voir Effets indésirables ]

Syndrome de greffe

Le syndrome de la greffe se manifeste comme de la fièvre inexpliquée et une éruption cutanée dans la période péri-drigrate. Les patients atteints du syndrome de greffe peuvent également avoir une hypoxémie de prise de poids inexpliquée et des infiltrats pulmonaires en l'absence de surcharge de liquide ou de maladie cardiaque. Si le syndrome de greffe non traité peut progresser vers une défaillance et la mort multiorganiques. Une fois le syndrome de la greffe reconnue, commencez le traitement par des corticostéroïdes afin d'améliorer les symptômes. [Voir Effets indésirables ]

Effets secondaires de la vitamine D 50000

Panne de greffe

La défaillance de la greffe primaire qui peut être mortelle est définie comme l'échec de Nombre de neutrophiles absolus supérieur à 500 par sang de microlitre au jour 42 après la transplantation. Le rejet immunologique est la principale cause de défaillance de la greffe. Les patients doivent être surveillés pour des preuves de laboratoire de récupération hématopoïétique. Envisagez de tester les anticorps HLA afin d'identifier les patients qui sont allo-immunisés avant la transplantation et pour aider à choisir une unité avec un type HLA approprié pour le patient individuel. [Voir Effets indésirables ]

Ménignes d'origine des donateurs

Les patients qui ont subi une transplantation sanguine du cordon HPC peuvent développer un trouble lymphoprolifératif post-transplantant (PTLD) se manifestant comme une maladie de type lymphome favorisant les sites non nodaux. Le PTLD est généralement mortel s'il n'est pas traité.

L'incidence du PTLD semble être plus élevée chez les patients qui ont reçu des antithymocytes globuline. On pense que l'étiologie est des cellules lymphoïdes donneuses transformées par le virus d'Epstein-Barr (EBV). La surveillance en série du sang pour l'ADN EBV peut être justifiée dans des groupes à haut risque.

La leucémie d'origine donneuse a également été signalée chez les bénéficiaires de sang de cordon HPC. L'histoire naturelle est présumée être la même que celle de la leucémie de novo.

Transmission d'infections graves

La transmission d'une maladie infectieuse peut se produire car Clevecord est dérivé du sang humain. La maladie peut être causée par des agents infectieux connus ou inconnus. Les donneurs sont dépistés pour un risque accru d'infection par le virus de l'immunodéficience humaine (VIH) le virus lymphotrope à cellules T humains (VRI (HTLV) Virus d'hépatite B (VHB) du virus (VHC) (VHC) (VHC) T. pâle T. Cruzi Virus du Nil occidental (WNV) transmissible des agents de l'encéphalopathie spongiforme (TSE) Vaccinia et virus Zika. Les donneurs sont également dépistés pour des preuves cliniques de septicémie et de risques de maladie transmissibles associés à la xénotransplantation. Les échantillons de sang maternel sont testés pour les types de VIH 1 et 2 HTLV Types I et II HBV HCV T. pâle Wnv et T. Cruzi . Clevecord est testé pour la stérilité. Il peut y avoir un effet sur la fiabilité des résultats des tests de stérilité si la mère du donneur de sang de cordon a été traitée avec des antibiotiques. Ces mesures n'éliminent pas totalement le risque de transmettre ces maladies infectieuses et les agents infectieuses transmissibles et les agents de la maladie. Signalez l'occurrence d'une infection transmise au Cleveland Cord Blood Center au 1-216-378-3032.

Des tests sont également effectués pour des preuves d'une infection des donneurs en raison de cytomégalovirus (CMV).

Les résultats des tests peuvent être trouvés dans les enregistrements qui l'accompagnent.

Transmission de maladies génétiques rares

Clevecord may transmit rare genetic diseases involving the hematopoietic system for which donor screening et/or testing has not been performed [see Effets indésirables ]. Les donneurs de sang de cordon ont été dépistés par les antécédents familiaux pour exclure les troubles héréditaires du sang et de la moelle. Clevecord a été testé pour exclure les donneurs atteints d'anémie et d'anémies drépanocytaires en raison d'anomalies dans les hémoglobines C D et E. En raison de l'âge du donneur à l'époque, la collection de Clevecord a lieu la capacité d'exclure les maladies génétiques rares est très limitée.

Utiliser dans des populations spécifiques

Grossesse

Résumé des risques

Il n'y a pas de données avec l'utilisation de Clevecord chez les femmes enceintes pour éclairer un risque associé au produit. Les études de reproduction animale n'ont pas été menées avec Clevecord. Dans la population générale américaine, le risque de fond estimé de malformations congénitales majeures et de fausse couche dans les grossesses cliniquement reconnues est respectivement de 2 à 4% et 15 à 20%.

Lactation

Résumé des risques

Il n'y a aucune information concernant la présence de Clevecord dans le lait maternel les effets sur le nourrisson allaité ou les effets sur la production de lait. Les avantages du développement et de la santé de l'allaitement doivent être pris en compte avec le besoin clinique de la mère de Clevecord et tout effet indésirable potentiel sur le nourrisson allaité de Clevecord ou de l'état maternel sous-jacent.

Usage pédiatrique

Le sang du cordon HPC a été utilisé chez les patients pédiatriques souffrant de troubles affectant le système hématopoïétique qui est hérité acquis ou résultant d'un traitement myéloablatif. [Voir Posologie et administration Effets indésirables et Études cliniques ]

Utilisation gériatrique

Les études cliniques sur le sang du cordon HPC (provenant de plusieurs banques de sang de cordon) n'ont pas fourni un nombre suffisant de sujets âgés de 65 ans et plus pour déterminer s'ils réagissent différemment des sujets plus jeunes. En général, l'administration de Clevecord aux patients de plus de 65 ans devrait être prudente, reflétant leur plus grande fréquence de diminution de la fonction rénale ou cardiaque hépatique ou de maladie concomitante ou autre médicament.

Maladie rénale

Clevecord contains Dextran 40 which is eliminated by the kidneys. The safety of Clevecord has not been established in patients with renal insufficiency or renal failure.

Informations sur la surdose pour Clevecord

Expérience de surdosage humain

Il n'y a eu aucune expérience de la surdose de sang de cordon HPC dans les essais cliniques humains. Doses uniques de clevecord jusqu'à 45 x 10 ⁷ TNC / kg ont été administrés. Le sang du cordon HPC préparé pour la perfusion peut contenir du diméthyl sulfoxyde (DMSO). La dose maximale de DMSO n'a pas été établie mais il est habituel de ne pas dépasser une dose de DMSO de 1 g / kg / jour lorsqu'elle est donnée par voie intraveineuse. Plusieurs cas d'altération mentale et de coma ont été signalés avec des doses plus élevées de DMSO.

Gestion de la surdose

Pour une surdose DMSO, les soins généraux sont indiqués. Le rôle d'autres interventions pour traiter la surdose du DMSO n'a pas été établi.

Contre-indications pour Clevecord

Aucun.

Pharmacologie clinique for Clevecord

Mécanisme d'action

Les cellules de la tige / progéniteur hématopoïétique du sang du cordon HPC migrent vers la moelle osseuse où elles divisent et mûrissent. Les cellules matures sont libérées dans la circulation sanguine où certains circulent et d'autres migrent vers les sites tissulaires pour restaurer partiellement ou entièrement les numéros sanguins et la fonction, y compris la fonction immunitaire des cellules transmises par le sang d'origine de la moelle. [Voir Études cliniques ]

Chez les patients présentant des anomalies enzymatiques dus à certains types graves de troubles de stockage des leucocytes matures résultant de la transplantation sanguine du cordon HPC peut synthétiser des enzymes qui peuvent être capables de circuler et d'améliorer les fonctions cellulaires de certains tissus indigènes. Cependant, le mécanisme d'action précis est inconnu.

Études cliniques

L'efficacité de Clevecord telle que définie par la reconstitution hématopoïétique a été démontrée dans une étude prospective à un seul bras et dans des revues rétrospectives des données d'une base de données d'observation pour Clevecord et dans les données des dockés et des informations publiques. Sur les 1299 patients dans le dossier et les données publiques, 66% (n = 862) ont subi une transplantation comme traitement de la malignité hématologique. Résultats pour les patients qui ont reçu une dose cellulaire nucléée totale ≥2,5 x 10 ⁷ / kg sont présentés dans le tableau 2. La récupération des neutrophiles est définie comme le temps de la transplantation à un nombre absolu de neutrophiles supérieurs à 500 par microlitre. La récupération des plaquettes est le temps d'un nombre de plaquettes de plus de 20000 par microlitre. La récupération des érythrocytes est le temps d'un nombre de réticulocytes supérieure à 30000 par microlitre. La dose cellulaire nucléée totale et le degré de correspondance HLA étaient inversement associés au temps de récupération des neutrophiles dans les données du dossier.

Tableau 2: Récupération hématopoïétique pour les patients trans plantés avec le sang HPC Blood total cellule nucléée (TNC) DOS E ≥ 2,5 x 10 ⁷ / kg

Informations sur les patients pour Clevecord

Discutez de ce qui suit avec les patients recevant Clevecord:

• Signalez immédiatement tous les signes et symptômes de réactions de perfusion aiguës telles que la fièvre des problèmes de respiration de la fatigue de la fatigue étourdissements nausées nausées vomissements vomissants ou douleurs musculaires.
• Signalez immédiatement tous les signes ou symptômes suggérant une maladie du greffon contre l'hôte, y compris la diarrhée des éruptions ou le jaunissement des yeux.

Instructions pour la préparation de la perfusion

I. Réactifs et fournitures d'équipement

Équipement:

• Cabine de sécurité biologique
• Bain-marie 37 ° C ± 1 ° C
• Scellant de chaleur du tube compatible avec le chlorure de polyvinyle (PVC)
• Échelle
• Chambre automatisé de compteur de cellules et / ou de microscope et de dénombrement des cellules pour le nombre de cellules et la détermination de la viabilité (facultative)
• Ouvre-cartouches de la thermogenèse
• Congélateur à azote liquide de phase de vapeur (LN2) à -150 ° C ou plus froid ou un expéditeur sec entièrement chargé. (L'équipement sèche expédié utilisé pour l'expédition de Clevecord peut être utilisé pour le stockage temporaire du produit congelé au centre de transplantation si un congélateur LN2 ou un espace de congélateur suffisant n'est pas disponible.)
• Extracteur de plasma
• Centrifuger

Réactifs

• 5% album (humain) USP
• Dextrane 40 dans l'injection de chlorure de sodium USP

Fournitures

• Cryogloves protecteurs
• Traitement de transplantation à deux sacs (par exemple Pall Medical 791-03)
• Sacs à fermeture éclair en plastique stérile
• Seringues jetables stériles: (5) 60 ml
• Aiguilles d'injection 18G
• 16g x 1½ aiguilles d'injection
• Hémostats (facultatif)
• Tampons de préparation à l'alcool
• Bâtons d'écouvillon d'iode
• Sac écrasant stérile si disponible

Formes

m Saux d'amphettes 25 mg effets

• Formulaire de réception de sang de corde de l'expéditeur et de HPC
• Instructions pour réception de l'expéditeur sec et du sang de cordon HPC au centre de transplantation

Instructions de réception

Clevecord is shipped frozen inside a steel canister placed inside a liquid nitrogen (LN2) charged tank specifically designed to keep the temperature at or below -150°C (dry shipper). Dry shippers consist of a protective shipping container with a large rounded lid carrying a LN2 tank with a flat lid (see Figure 1). Clevecord must be stored at or below -150°C either in the LN2 tank inside the dry shipper for short-term storage (up to 48 hours) or inside a LN2 -cooled storage device at the Transplant Center for storage greater than 48 hours. Recharge the tank with fresh LN2 if Clevecord is to remain stored in the dry shipper for more than 48 hours.

Figure 1: Composants et configuration des expéditeurs secs

Utilisez les instructions suivantes pour compléter l'expéditeur sec et le formulaire de réception de sang du cordon HPC confirmant la réception de l'unité Clevecord et vérifiant l'identité de l'unité pour le destinataire prévu. Deux membres du personnel du centre de transplantation formé sont tenus de recevoir et de vérifier l'unité Clevecord.

1. Inspectez l'expéditeur sec à réception pour la falsification ou les dommages.
2. Coupez et retirez la fermeture éclair NMDP bleue TOUTES les liens zippés et enveloppement d'expédition de cellophane. Ouvrez le grand couvercle arrondi du conteneur d'expédition protecteur.
3. Inspectez l'enregistreur de données de température qui est situé sur le dessus du couvercle plat du réservoir LN2 à l'intérieur de l'expéditeur sec. Observer la température indiquée sur l'enregistreur de données et dans la section 2 de la Formulaire de réception de sang de corde de l'expéditeur et de HPC Enregistrer si la température indiquée est à ou inférieure à -150 ° C.
   NOTE: Après le retour de l'expéditeur sec, le Cleveland Cord Blood Center téléchargera les enregistrements de température à partir de l'enregistreur de données. Sur demande par le centre de transplantation, une impression des lectures de température sera fournie par télécopieur ou e-mail pour valider que l'unité Clevecord a été maintenue ou inférieure à -150 ° C à tout moment pendant l'expédition.
4. Retirez le paquet de paperasse attaché à l'intérieur du grand couvercle arrondi. Obtenez la combinaison de cadenas enfermée dans le paquet. Utilisez la combinaison de cadenas pour retirer le cadenas du couvercle plat sur le réservoir LN2 à l'intérieur de l'expéditeur sec.
5. Retirez soigneusement le couvercle du réservoir LN2 par une légère rotation et en utilisant des gants cryogéniques, éliminez rapidement Clevecord enfermé dans la (s) métal. Placez immédiatement la cartouche métallique dans un réservoir avec LN2 ou dans la phase de vapeur d'un congélateur LN2 à une température ou en dessous de -150C (si disponible).
6. Placez tous les matériaux d'emballage à l'intérieur du réservoir LN2 et remplacez le couvercle en s'assurant que la sonde de température s'étend jusqu'au bas du réservoir LN2 et que le fil de sonde de température n'est pas plié.
7. Ouvrez soigneusement la cartouche métallique avec l'outil d'ouverture de la cartouche (inclus). Gérer avec prudence pour éviter les dommages à Clevecord Cryobag.
8. Inspectez l'intégrité du cryobag.
   NOTE: S'il y a des dommages au cryobag, retournez le cryobag au stockage à -150 ° C ou en dessous (contenir le cryobag dans un écrasement si nécessaire). Consultez le médecin de transplantation et contactez Cleveland Cord Blood Center (CCBC).
9. Enregistrez le numéro d'identification des donateurs (DIN) de l'étiquette Cryobag sur le Réception de sang de l'expéditeur sec et du cordon HPC Formulaire. Le DIN sur Clevecord doit inclure le numéro d'identification de l'installation CCBC (W4215). Les grands produits Clevecord peuvent être divisés en deux cryobags et les caractères de drapeau tourné après le DIN, les produits individuels identifiés par les codes de drapeau 01 et 02.
10. Vérifiez que le Din Clevecord accepte exactement avec le Din précédemment sélectionné pour le destinataire prévu. Vérifiez le match et l'impression et la connexion dans la section 2
11. Stockez Clevecord dans un congélateur LN2 jusqu'à ce qu'il soit prêt à dégeler pour une utilisation.
12. Compléter la section 2 du Expéditeur sec et HPC Réception de sang du cordon Forme et fax au Cleveland Cord Blood Center au (216) 896-0320.
13. Retrachez le cadenas fourni au couvercle plat du réservoir LN2 à l'intérieur de l'expéditeur sec et brouillez le code pour le verrouillage sécurisé.
14. Sécurisez le grand couvercle arrondi du conteneur d'expédition protecteur et suivez les instructions de la section VI. Pour le retour de l'expéditeur sec.
    NOTE: S'il y a une erreur ou une ambiguïté en ce qui concerne la documentation ou l'état du produit Fermez le réservoir LN2 pour garder le produit à ou en dessous de -150 ° C Ne procédez pas tant que le problème n'est pas résolu.

Si la documentation et le produit sont acceptables mais que votre installation ne dispose pas de congélateur LN2 ou d'insuffisance d'espace de stockage LN2 pour le produit Clevecord congelé, le SECR Shipper CCBC peut être utilisé pour le stockage temporaire. Informez CCBC que le retour de l'expéditeur sec sera retardé à l'objectif du stockage temporaire des produits sur le site.

Si le stockage pendant plus de 48 heures est nécessaire, ajoutez le LN2 frais au réservoir à l'intérieur de l'expéditeur sec pour continuer

Préparation

un. Coordination avec l'équipe clinique

1. Confirmez la perfusion de transplantation à l'avance et ajustez l'heure de début de la dégel pour que l'unité soit disponible pour la perfusion lorsque le destinataire est prêt.
2. Consultez les cliniciens concernant le volume final du produit en fonction du poids du receveur et des éventuelles restrictions de fluide pour déterminer si la procédure d'élimination du DMSO et de réduction du volume (section VI.3) doit être suivie.

né Préparez le bain-marie et vérifiez que la température est de 37 ° C ± 1 ° C.

c. Enregistrez le numéro de lot d'informations du fabricant et la date d'expiration (le cas échéant) de tous les réactifs et jetables. Utilisez uniquement des matériaux stériles lors du traitement du produit Clevecord.

d. Préparation de la solution de dextran 40 / albumine.
NOTE: Utilisez la technique aseptique dans une armoire de sécurité biologique pour toutes les étapes de traitement, y compris tous les traitements ouverts et tous les pointes des ports de conteneurs.

1. Combinez 100 ml de solution de dextran 40 et 100 ml de solution d'albumine dans un sac de transfert stérile de 300 ml. Grampez le tube avec un hémostat. Préparez une solution fraîche le jour de la transplantation et stockez à 15-25 ° C.
2. Ajustez une (1) seringue de 60 ml avec une aiguille de calibre 18 et dessinez une solution de dextran-40 / albumine de 25 ml du sac de transfert de 300 ml.

e. Préparez un conteneur portable avec LN2 pour le stockage du produit Clevecord gelé

f. Avec les fichiers de produits et de receveurs à la main, localisez et retirez le produit congelé du stockage dans le congélateur LN2 ou l'expéditeur sec et vérifiez la précision de l'étiquetage de l'identité du produit des informations et l'intégrité des conteneurs. Deux membres formés du personnel de laboratoire sont nécessaires pour ce processus de vérification.

g. Retirez tout segment attaché à l'unité dans un cryovial de 2 ml et stockez en phase de vapeur ou liquide de l'azote (en dessous de -150 ° C).

h. Transférez immédiatement le produit du stockage LN2 dans le conteneur LN2 portable. Reposez-vous en phase de vapeur pendant 5 à 10 minutes avant la manipulation supplémentaire.

Procédure

Deux procédures différentes de préparation de Clevecord pour la perfusion sont fournies. La première procédure appelée procédure de dilution concerne la dilution du produit décongelé, ce qui donne un volume de produit d'environ 170 ml pour la perfusion (section IV.2 ci-dessous). La deuxième procédure appelée la procédure de dilution et de réduction du volume implique la centrifugation du produit décongelé et dilué suivi d'une élimination du surnageant produisant un volume de produit réduit (25-35 ml), susceptible de perfusion chez les patients pédiatriques (section IV.3 ci-dessous).

Dégel

1. Utilisez des gants cryoprotecteurs. Appliquer un équipement de protection individuelle.
2. Ouvrez la cartouche avec l'outil d'ouverture de la cartouche. Gérer attentivement pour éviter d'endommager le cryobag contenant l'unité Clevecord gelée. Examinez attentivement le cryobag pour les pauses ou les fissures.
3. Retirez le cryobag Clevecord de la cartouche.
4. Essuyez la surface externe du cryobag avec de l'alcool isopropylique.
5. Placer le cryobag Clevecord dans un sac à fermeture éclair en plastique propre. Laissez l'air sortir du sac à fermeture éclair et fermez-le étroitement. Utilisez un sac à fermeture éclair en plastique stérile si disponible.
   NOTE: L'essuyage de la surface externe du cryobag avec de l'alcool isopropylique avant de se placer à l'intérieur du sac à bloc de fermeture éclair stérile réduit le risque de contamination et permet au laboratoire de décongélation de récupérer potentiellement le produit dans le cas d'une fuite inattendue ou d'une défaillance du conteneur pendant les procédures de dilution et de réduction du volume.
6. Placer le sac à fermeture éclair en plastique contenant le cryobag Clevecord congelé dans le bain-marie préchauffé à 37 ° C ± 1 ° C.
7. Documentez l'heure de début de la procédure de dégel.
8. Agitez doucement et soigneusement le cryobag dans le bain-marie pour accélérer le dégel et la remise en suspension des cellules. Use your fingers to massage the bag to ensure uniform distribution of heat.
9. Surveillez attentivement toutes les fissures ou les cassures comme indiqué par les globules rouges qui fuyent le cryobag dans le sac à fermeture éclair en plastique.
10. Si une fuite est vue, gardez le site de fuite en position verticale pour éviter de fuir davantage tout en continuant à agiter doucement le cryobag jusqu'à ce que le produit soit sans fondement. Si le point réalisable attribue le site de fuite avec un hémostat. (Voir la section VII Procédure de récupération d'urgence en cas de défaillance du conteneur pour les procédures de récupération d'urgence des cellules sanguines de cordon décongelées).
11. Si aucune fuite n'est vue, retirez le sac à fermeture éclair en plastique du bain-marie lorsque le produit est complètement couloir (c'est-à-dire lorsque tous les cristaux de glace visibles ont disparu).
12. Documentez l'heure d'arrêt de la procédure de dégel.
    NOTE: Le temps d'expiration recommandé de la Clevecord décongelée est de 4 heures à partir de la fin de la dégel à l'étape IV.1.1 si elle est stockée à 15-25 ° C.
13. Séchez doucement l'extérieur du sac de le désinfecter avec de l'alcool et le placer dans une armoire de sécurité biologique.
14. Passez à la section IV.2 pour la procédure de dilution ou la section IV.3 pour la procédure de dilution et de réduction du volume.

Dilution (~ 170 ml de volume pour la perfusion)

1. Effectuez toutes les étapes d'une armoire de sécurité biologique en utilisant une technique aseptique
2. Obtenez un ensemble de transplantation à deux sacs (voir figure 2).
3. Faire chauffer le tube entre la transplantation et les sacs de transfert (entre le port sur le sac de perfusion et SC-1). Jeter le sac de transfert et les tubes de connexion.
4. Étiquetez le sac de transplantation avec le Din Clevecord et le nom du bénéficiaire ou selon la pratique standard institutionnelle.
5. Confirmez que toutes les pinces sont fermées.
6. Retirez le cryobag Clevecord décongelé du sac à fermeture éclair. À l'aide d'un bâton d'écouvillon d'iode, désinfectez les couvercles des deux ports sur le cryobag.
7. Désinfecter les ciseaux avec de l'alcool et couper les couvertures hermétiquement scellées vers les ports de pointes sur le cryobag.
8. Désinfectez les surfaces coupées des deux ports de pointes à l'aide d'un bâton d'écouvillon d'iode et insérez les deux pointes de l'ensemble de greffe.
9. Fixez la seringue de 60 ml avec une solution de Dextran-40 / albumine de 25 ml à Female Luer Lock. Ouvrez PC-1 PC-2 et PC-3, puis ajoutez lentement 25 ml de solution dextran-40 / albumine au produit Clevecord décongelé. Mélanger par massage doux.
10. Fermer PC-3. Laisser 5 minutes à 15-25 ° C pour l'équilibrage avec le cryobag Clevecord et la greffe placée à plat sur une surface propre.
11. Open PC-4. Transférer le Clevecord dilué du cryobag vers le sac de transplantation. Fermer PC-1 et PC-2.
12. Attachez la première seringue contenant 60 ml de solution de dextran-40 / albumine à la serrure Luer. Ouvrez PC-1 PC-2 et PC-3. Transférer la solution de 60 ml dans le sac de congélation. Fermer PC-3 et ouvrir PC-4. Transférer 60 ml de solution de dextran-40 / albumine au sac de transplantation. Massez doucement le sac de transplantation afin de mélanger la suspension des cellules Clevecord.
13. Répétez l'étape (L) en utilisant la deuxième seringue contenant 60 ml de solution dextran-40 / albumine. Le volume final devrait environ 170 ml (25 ml d'unité Clevecord et (25 60 60 =) 145 ml de solution de dextran - 40 / albumine).
14. Sceller les tubes entre PC-4 et IP-1 et déconnecter. Jeter les pointes Luer Lock et la connexion des tubes.
15. Attachez aseptiquement une aiguille de calibre 18 à un insert de seringue de 60 ml dans le port IP-1 et supprimez une aliquote de 5 ml pour les tests de contrôle de la qualité.
16. Placer le sac de transplantation à l'intérieur d'un sac écrasant stérile et placer à plat à l'intérieur d'un bac à température ambiante (15-25 ° C).
17. Transportez le produit Clevecord vers le site de transplantation clinique selon le SOP de l'établissement.
    NOTE: The recommended expiration time of thawed Clevecord is 4 hours from the end time of thaw if stored at 15-25°C.

Figure 2: Traitement de la transplantation à deux sacs

Qu'est-ce que la sulfasalazine est utilisée pour traiter

3. Dilution et réduction du volume (~ 25-35 ml de volume pour la perfusion)

1. Effectuez toutes les étapes d'une armoire de sécurité biologique en utilisant une technique aseptique.
2. Obtenez un ensemble de transplantation à deux sacs (voir figure 2).
3. Étiquetez les deux sacs de l'ensemble à deux sacs avec le Din Clevecord attribué.
4. Confirmez que toutes les pinces sont fermées.
5. En utilisant un bâton d'écouvillon d'iode désinfecter les couvertures des deux ports sur le cryobag décongelé.
6. Désinfecter les ciseaux avec de l'alcool et couper les couvertures hermétiquement scellées vers les ports de pointes sur le cryobag décongelé.
7. Désinfectez les surfaces coupées des deux ports de pointes à l'aide d'un bâton d'écouvillon d'iode et insérez les deux pointes de l'ensemble à deux sacs.
8. Attachez la seringue 1 avec 25 ml de solution dextran-40 / albumine à Female Luer Lock. Ouvrez PC-1 PC-2 et PC-3, puis ajoutez lentement 25 ml de solution dextran-40 / albumine au Clevecord Cryobag et mélange décongelé.
9. Poussez et tirez lentement le piston de seringue pour mélanger les solutions Clevecord et Dextran- 40 / Albumine; Répétez trois à quatre fois.
10. Transférez l'intégralité du volume dans le cryobag. Fermer PC-3. Laisser 5 minutes à 15-25 ° C pour l'équilibrage avec le cryobag Clevecord et la greffe placée à plat sur une surface propre.
11. Open PC-4. Transférer l'unité Clevecord diluée du cryobag dans le sac de transplantation. Fermer PC-1 et PC-2.
12. Attachez la seringue 2 contenant 60 ml avec la solution dextran-40 / albumine à la serrure Luer. Open PC-3. Transférer la solution de 60 ml via le cryobag dans le clevecord dilué dans le sac de transplantation. Massez doucement le sac de transplantation afin de mélanger la suspension des cellules Clevecord.
13. Répétez l'étape (l.) En utilisant la seringue 3 contenant 60 ml de solution dextran-40 / albumine. Le volume final devrait désormais environ 170 ml (25 ml d'unité Clevecord et (25 60 60 =) 145 ml de dextran - 40 / albumine Solution)
14. Fermer PC-3 et ouvrir PC-1 et PC-2. Passez la suspension diluée de 170 ml de Clevecord dans les deux sens entre le sac de transplantation et le cryobag deux ou trois fois pour passer autant de cellules du cryobag dans le sac de transplantation. Fermer PC-4.
15. Sceller les tubes entre PC-4 et IP-1 et déconnecter. Jeter les pointes Luer Lock et la connexion des tubes.
16. Confirmer PC-5 et SC-1 sont fermés. Placer la transplantation Traitement à deux sacs dans un sac d'éclairage stérile et dans un seau à centrifugeuse.
17. Soutenez entièrement l'ensemble du traitement de la transplantation à deux sacs avec un produit décongelé avec des inserts pour empêcher la formation de plis pendant la centrifugation.
18. Équilibrez les porteurs et centrifugeuse pendant 20 min à 400 x g à 10 ° C sans frein.
19. Après centrifugation, retirez soigneusement l'ensemble de transplantation centrifugé à deux sacs du seau à centrifugeuse. Faites attention à ne pas déranger les cellules au fond du sac. Enregistrez la date / heure supprimée de la centrifugeuse.
20. Accrochez le sac de transplantation dans un extracteur de plasma. Fermez lentement la porte de l'extracteur de plasma.
21. Ouvrez PC-5 et utilisez SC-1 pour ajuster le flux de surnageant. Transférer très lentement la majeure partie du surnageant dans le sac de transfert.
22. Videz le tube entre les sacs en transférant l'air du sac de transfert dans le sac de transplantation.
23. Fermer PC-5.
24. Attachez aseptiquement une aiguille de calibre 18 à un insert de seringue de 60 ml dans le port IP-1 et supprimez une aliquote de 5 ml pour les tests de contrôle de la qualité.
25. Placer le sac de transplantation à l'intérieur d'un sac écrasant stérile et placer à plat à l'intérieur d'un bac à température ambiante (15-25 ° C).
26. Transportez le produit Clevecord vers le site de transplantation clinique selon le SOP de l'établissement.
    NOTE : Le temps d'expiration recommandé de la Clevecord dégel est à 4 heures de la fin du dégel si elle est stockée à 15-25 ° C.

Contrôle de qualité

Effectuer des tests de contrôle de la qualité par politiques et procédures du centre de transplantation en utilisant l'aliquote du produit décongelé obtenu à l'étape IV.2.o. ou iv.3.x. Les tests recommandés comprennent:

• Nombre de cellules nucléées
• Test de viabilité
• Nombre de cellules CD34 viable
• Unité de formation de colonie
• Cultures microbiennes (anaérobie aérobie et fongique)

Exigences administratives

Préparez un résumé écrit de la procédure, notamment:

1. Clevecord ID number
2. Date de réception de l'unité Clevecord
3. Température de stockage de l'azote liquide
4. Date de dégel, y compris si et à quel stade les fuites ou les fissures se sont produites
5. Date et heure de l'unité Clevecord retirée du stockage de l'azote liquide
6. Volume de produit final
7. TNC (cellule nucléée totale du nombre de CD34
8. Viabilité des cellules récupérées (TNC ou CD34) plus nom de la méthode de test utilisée
9. Résultats des cultures bactériennes et fongiques

2. Faites une copie du rapport pour vos dossiers

3. Fax une copie du rapport au Cleveland Cord Blood Center au (216) 896-0320

4. Retournez l'expéditeur sec au Cleveland Cord Blood Center. L'adresse de retour est:

Cleveland Cord Blood Center 25001 Emery Road Suite 150 Cleveland OH 44128 Téléphone: (216) 896-0360 Fax: (216) 896-0320

Procédure de récupération d'urgence en cas d'échec de conteneur

Précautions générales

Utilisez des procédures standard et du personnel formé pour effectuer un échantillonnage après la réception et / ou un sauvetage des sacs. Comme les cryobags peuvent être très fragiles, le sac de sang de cordon congelé avec un soin extrême à chaque étape, y compris l'ouverture des conteneurs métalliques, l'inspection de la décongélation et / ou du lavage. Effectuez toutes les étapes sur les bancs de laboratoire dans une armoire de sécurité biologique ou une autre surface pour empêcher une goutte accidentelle de l'unité congelée. Pour faciliter le dégel, retirez progressivement l'unité Clevecord de la phase liquide de la zone de stockage LN2 en suspendant dans la phase de vapeur pendant au moins cinq minutes avant de porter le conteneur à température ambiante. Essuyez la surface externe du cryobag avec de l'alcool isopropylique avant d'être placé à l'intérieur d'un sac à fermeture éclair stérile. Cela permettra au laboratoire de cellules de récupérer potentiellement le produit dans le cas d'une fuite inattendue ou d'une défaillance du conteneur pendant la dilution de la décongélation ou la réduction du volume.

Reprise d'urgence

un. Si le cryobag Clevecord est observé pour être fissuré lorsqu'il est retiré du récipient de stockage LN2 ou si des fissures ou des fuites se produisent pendant le dégel informe immédiatement le centre sanguin de cordon de Cleveland par téléphone au (216) 378-3032 ou (216) 896-0493. Informer le médecin de transplantation et l'équipe de transplantation et le directeur de laboratoire dès que possible.

né Le médecin ou l'équipe de transplantation déterminera s'il faut utiliser ou éliminer le produit Clevecord et si des unités de sang de cordon HPC supplémentaires doivent être demandées.

c. Si le médecin ou l'équipe de transplantation décide que le produit dans le cryobag qui fuit pourrait être utilisé, l'unité Clevecord peut être récupérée comme suit:

1. Obtenez des tasses d'échantillonnage stériles et des seringues stériles.
2. Ouvrez une tasse d'échantillonnage stérile et réglez une tasse dans un espace de travail pour recevoir le contenu du sac à fermeture éclair.
3. Si des contenus restent dans le cryobag Clevecord cassé, retirez le contenu du cryobag à l'aide de seringues stériles.
4. Laver tous les contenus du cryobag Clevecord et transférer le contenu dans un nouveau sac de transfert (sac de sauvetage).
5. En utilisant une seringue stérile, transfert à 20 ml de la solution de dextran-40 / albumine dans le sac de transfert de 300 ml dans une tasse d'échantillon stérile.
6. À l'aide d'une pipette stérile, obtenir 3 ml de solution de dextran-40 / albumine à partir de la tasse d'échantillon et injectez-vous dans le sac zip-verrouillage contenant les teneurs Clevecord Clevecord restantes qui ont fui lors du dégel.
7. En utilisant une pipette stérile différente, retirez la solution de clevecord et dextran-40 / albumine du sac zip-verrou et placer dans une tasse d'échantillon stérile.
8. Répétez les étapes VI et VII jusqu'à ce que tous les Clevecord restants soient transférés dans la tasse d'échantillon stérile.
9. À l'aide d'une seringue stérile de 20 ml, tirez le contenu de la tasse d'échantillonnage stérile dans la seringue. Injectez la solution dans le sac de sauvetage.
10. Répétez jusqu'à ce que tout le contenu de la tasse d'échantillon soit transféré dans le sac de sauvetage.